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電鏡固定液操作說明及注意事項(xiàng)
更新時(shí)間:2022-06-30   點(diǎn)擊次數(shù):6873次
   電鏡固定液主要成分為2.5%的戊二醛,對(duì)組織超微結(jié)構(gòu)固定較好。適用于常規(guī)透射電鏡組織標(biāo)本的固定。
  操作說明:
  將取出的組織切成1mm3  大小,然后用牙簽或鑷子將組織塊移至盛有冷的固定液的小瓶中。在4℃條件下固定2-4h。如果組織帶有較多的血液和組織液,應(yīng)先用固定液洗幾遍,然后再切成小塊固定。如不能一次性切成 1mm3 的大小也可以先切成稍微大點(diǎn)的組織塊,然后邊固定邊修成1mm3 大小的。
  注意事項(xiàng):
  組織從活體取下后應(yīng)在1分鐘內(nèi)放入到預(yù)冷的電鏡固定液中。操作在低溫(0-4℃)下進(jìn)行,以降低酶的活性,防止細(xì)胞自溶。
  所取組織的體積要小,不要超過1mm3。因?yàn)楣潭▌┑臐B透能力較弱,組織塊如果太大,組織塊的內(nèi)部將不能得到良好的固定。組織塊修切時(shí)也要在冷的固定液中進(jìn)行。
  取材部位要準(zhǔn)確,機(jī)械損傷要小,解剖器械應(yīng)鋒利,操作宜輕,避免牽拉、挫傷與擠壓。
  電鏡固定液可以保存多久:
  可以長期保存。但是需要在特定適宜的溫度,一般是4°和固定適合的環(huán)境下。
  甲醛固定液在4℃可存放半年,這是推薦的存放溫度。一般是推薦的,這時(shí)戊二醛可以長時(shí)間保存,但是如果時(shí)間太長可能會(huì)出現(xiàn)變色的問題,就可以換一次戊二醛。
  而還有不同的固定液也不同。比如用于外科活檢固定的良好固定液,用于固定大多數(shù)器官和組織,適用于結(jié)締組織,尤其是三色染色時(shí)候更為理想,固定效果好,組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整。細(xì)胞和著色鮮明,但細(xì)胞質(zhì)著色差。對(duì)脂肪固定好,尤其適用于含脂肪的淋巴結(jié)、乳腺組織和脂肪瘤標(biāo)本的固定。
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